Translated title: Primary and secondary somatic enbryogenesis in leaf sections and cell suspensins of coffea arabica cv. catimor

Abstract

El principal objetivo de esta investigación fue caracterizar y optimizar el desarrollo de embriones somáticos secundarios en café (Coffea arabica cv. Catimor). Adicionalmente, dado que la formación de embriones somáticos primarios es la etapa previa a la diferenciación de embriones somáticos secundarios, se compararon tres métodos para su inducción: 1) medio sólido en dos etapas, primero un medio con 4,5µM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 35µM de benciladenina (BA), y luego un medio con 4,3µM de ácido naftalenoacético, 2) medio sólido con 4,4-53,3µM BA en una etapa, y 3) cultivos en suspensión. En este último tratamiento el callo se formó en dos etapas de medio sólido, un medio con 9,3µM de cinetina y 2,3µM de 2,4-D y un segundo medio con 22,2µM de BA, así como en un tercer medio líquido con 35µM de BA. Todos los tratamientos indujeron la embriogénesis somática primaria y secundaria. El máximo rendimiento de embriones somáticos primarios se obtuvo en suspensiones celulares. Los embriones somáticos secundarios se diferenciaron directamente a partir de células epidérmicas y subepidérmicas en la zona hipocotilar de los embriones somáticos primarios.

Translated abstract

The main purpose of this research was to characterize and optimize the development of secondary somatic embryos in coffee (Coffea arabica cv. Catimor). In addition, as the primary somatic embryos formation is the previous stage to the differentiation of secondary somatic embryos, three methods for its induction were compared: 1) solid media in two stages, first in a medium with 4.5µM of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) and 35µM of benzyladenin (BA) and then in a medium with 4.3µM naphtaleneacetic acid, 2) solid media with 4.4-53.3µM BA in one stage, and 3) suspension cultures. In the latter treatment the callus was formed in two stages of solid media, one containing 9.3µM of kinetin and 2.3µM of 2,4-D, and a second one with 22.2µM of BA, and a third liquid medium with 35µM of BA. All the treatments induced primary and secondary somatic embryogenesis. The highest yield of somatic embryos was obtained in suspension cultures. The secondary somatic embryos differentiated directly from epidermal and subepidermal cells of the hypocotilar zone of the primary somatic embryos.

Translated abstract

O objetivo principal de este estudo foi caracterizar e melhorar u desenvolvimento dos embriões somáticos secundários no café (Coffea arabica cv. Catimor). Ademais, devido a que u desenvolvimento dos embriões somáticos primários e a primeira estágie da diferenciación dos embriões somáticos secundários, foram comparados três metodos para indução: 1) um meio solido em dois estágios, primeiro meio com 4,5µM do ácido 2,4-diclorofenoxiacetico (2,4-D) e 35µM do benzyladenine (BA) e segundo meio com 4,3µM do ácido naftalenoacético, 2) um meio solido em uma estágio (4,4-53,3µM BA), e 3) suspensões celulares. Em esse ultimo tratamento, u calo fui formado em dois estágies do meio solido, uma com 9,3µM do cinetine e 2,3µM da 2,4-D, e segundo com 22,2µM do BA, e um terceiro meio líquido com 35µM do BA. Todos os tratamentos induziram embriognese somática primária e secundária. O rendimento mais elevado dos embriões somáticos foi obtido em suspensões celulares. Os embriões somáticos secundários foram diferenciados na maneira direta das células epidérmicas e subepidérmicas da zona hipocotilar dos embriões somáticos primários.