Tips for Studies with Quantitative Morphology (Morphometry and Stereology) Translated title: Consejos para los Estudios de Morfología Cuantitativa (Morfometría y Estereología)

Abstract

SUMMARY: The quantitative morphology contributes to making the studies less subjective and reproducible. Quantitative results are analyzed with statistics and should be based on a well-defined sample. Quantitative variables can be ‘continuous’ or ‘discrete.' In this text, the term ‘morphometry’ is used to design a simpler procedure for measuring structures with a ‘ruler.' The term ‘stereology’ is used in estimating quantities in the 3-dimensional space analyzing 2-D cut sections. Correction factors may be necessary for the retraction and compression of the tissues. In histological sections, the ‘caps’ of the objects that have been sectioned tangentially are lost when chemical agents remove the paraffin distorting the analysis. Moreover, the analyses based on digital images should consider the same format and the same size (pixels) to all pictures allowing a comparison between groups. Stereology can be ‘model-based’: points within a frame are counted to estimate the ‘volume density’ (Vv) of a structure, and intercepts are counted to assess the ‘surface density’ (Sv). Counting structures within a frame allow estimating the ‘length density’ (Lv). Newer and more complex ‘design-based’ procedures are considered unbiased. The key point is that design-based inference does not require assumptions about the material and uses the ‘random sampling’ approach. The estimation of the number of objects requires a 3-D (volume) probe and therefore the ‘disector’ technique. This review aimed to contribute to the execution of the project, the correct sampling and the data obtained with morphometry and stereology.

Translated abstract

RESUMEN: La morfología cuantitativa contribuye a que los estudios sean menos subjetivos y reproducibles. Los resultados cuantitativos son analizados con estadística y deben basarse en una muestra bien definida. Las variables cuantitativas pueden ser "continuas" o "discretas". En este texto, el término 'morfometría' es usado para diseñar un procedimiento más simple para medir estructuras con una 'regla'. El término "estereología" se usa para estimar cantidades en espacio 3-D analizando secciones de corte en 2-D. Factores de corrección pueden ser necesarios por la retracción y compresión de los tejidos. En secciones histológicas, los "tapones" de las muestras que han sido seccionadas tangencialmente se pierden cuando los agentes químicos eliminan la parafina distorsionando así el análisis. Además, los análisis basados en imágenes digitales deben considerar el mismo formato y el mismo tamaño (píxeles) para todas las imágenes, lo que permite una comparación entre grupos. La estereología puede estar "basada en modelos": los puntos dentro de un marco se cuentan para estimar la "densidad de volumen" (Vv) de una estructura, y las interceptaciones o intersecciones son contadas para evaluar la "densidad de superficie" (Sv). Las estructuras contadas dentro de un marco permiten estimar la 'densidad de longitud' (Lv). Los procedimientos más nuevos y más complejos basados en el diseño se consideran imparciales y objetivos. El punto clave es que el diseño basado en la inferencia no requiere suposiciones acerca del material y utiliza el enfoque de "muestreo aleatorio". La estimación del número de objetos requiere una prueba 3-D (volumen) y, por lo tanto, la técnica "disector". Esta revisión tuvo como objetivo contribuir a la ejecución del proyecto, el muestreo correcto y los datos obtenidos con morfometría y estereología.