Toxoplasma gondii is an obligate intracellular apicomplexan parasite that infects almost all warm-blooded vertebrates. Heat shock proteins (HSP) regulate key signal transduction events in many organisms, and heat shock protein 90 (Hsp90) plays an important role in growth, development, and virulence in several parasitic protozoa. Here, we discovered increased transcription of the Hsp90 gene under conditions for bradyzoite differentiation, i.e. alkaline and heat shock conditions in vitro, suggesting that Hsp90 may be connected with bradyzoite development in T. gondii. A knockout of the TgHsp90 strain ( ΔHsp90) and a complementation strain were constructed. The TgHsp90 knockout cells were found to be defective in host-cell invasion, were not able to proliferate in vitro in Vero cells, and did not show long-time survival in mice in vivo. These inabilities of the knockout parasites were restored upon complementation of TgHsp90. These data unequivocally show that TgHsp90 contributes to bradyzoite development, and to invasion and replication of T. gondii in host cells.
Toxoplasma gondii est un Apicomplexa parasite intracellulaire obligatoire qui infecte presque tous les vertébrés à sang chaud. Les protéines de choc thermique régulent les événements principaux de transduction du signal chez de nombreux organismes et la protéine de choc thermique 90 (Hsp90) joue un rôle important dans la croissance, le développement et la virulence chez plusieurs protozoaires parasites. Dans ce travail nous avons découvert une augmentation de la transcription du gène de Hsp90 dans les conditions de différenciation des bradyzoïtes et de chocs alcalins et thermiques in vitro, ce qui suggère que Hsp90 est lié au développement des bradyzoïtes chez T. gondii. Un knock-out de la souche TgHsp90 ( ΔHsp90) et une souche de complémentation ont été construits. Les cellules knock-out TgHsp90 se sont révélées défectueuses dans l’invasion des cellules hôtes, n’ont pas pu proliférer in vitro dans des cellules Vero et n’ont pas montré de survie de longue durée chez la souris in vivo. Ces défauts des parasites knock-out ont été restaurés lors de la complémentation de TgHsp90. Ces données montrent sans équivoque que TgHsp90 contribue au développement des bradyzoïtes, et à l’invasion et à la réplication de T. gondii dans les cellules hôtes.