Resumen Introducción: los osteocitos son capaces de detectar diferentes señales, transducirlas en respuestas biológicas y trasmitirlas a los osteoblastos y osteoclastos, permitiendo el mantenimiento de la homeostasis ósea. La mecanotransducción ósea es posible gracias a que los osteocitos presentan diferentes estructuras mecanosensoras como las conexinas (Cx), las integrinas, el cilio primario e incluso receptores acoplados a proteínas G como el receptor de la parathormona tipo 1 (PTH1R). Objetivo: analizar la posible interacción de los diferentes elementos mecanosensores de los osteocitos y ver su influencia en la respuesta biológica. Material y métodos: se trabajó con las líneas celulares osteocíticas MLO-Y4 Cx43+/+ (scrambled (SCR) y ARNi α2) y Cx43-/-. Resultados y conclusión: los resultados obtenidos muestran que la Cx43 y la integrina α2 se encuentran involucradas en el aumento de la longitud del cilio primario, afectando potencialmente a su funcionalidad como mecanosensor (SCR vs. ARNi α2, p < 0,0001 SCR vs. Cx43-/- y p < 0,0001 ARNi α2 vs. Cx43-/-). La integrina α2 también influyó en la localización celular de Cx43 promoviendo que esta se encuentre en la membrana plasmática. También se observó que la activación de PTH1R por agonistas como parathormona (PTH) y proteína relacionada con la parathormona (PTHrP) inducen la fosforilación de la quinasa ERK 1/2, y estos efectos podrían verse afectados por la deficiencia en Cx43, pero no parecen ser mediados por el silenciamiento de integrina α2. Finalmente, se observó que la presencia de la Cx43 y de integrina α2 en los osteocitos aumenta su capacidad de adhesión (Cx43+/+ SCR y ARNi α2 vs. CX43-/- p < 0,001 y p = 0,0039) y que la deficiencia en Cx43 provoca un incremento de la mortalidad de estas células (Cx43-/- vs. Cx43+/+ p = 0,0074).
Abstract Background: osteocytes are capable of detecting different signals, transducing them into biological responses and transmitting them to osteoblasts and osteoclasts, allowing the maintenance of bone homeostasis. Bone mechanotransduction is possible because osteocytes have different mechanosensor structures such as connexins (Cxs), integrins, the primary cilium and even receptors coupled to G proteins such as the type 1 parathyroid hormone receptor (PTH1R). Objective: to analyze the possible interaction of the different mechanosensor elements of the osteocytes and to observe their influence on the biological response. Material and methods: we worked with the osteocytic cell lines MLO-Y4 Cx43+/+ (scrambled [SCR] and RNAi α2) and Cx43-/-. Results and conclusion: our results show that Cx43 and integrin α2 are involved in lengthening the primary cilium, potentially affecting its functionality as a mechanosensor (SCR vs RNAi α2, p < 0.0001 SCR vs Cx43-/- and p < 0.0001 RNAi α2 vs Cx43-/-). The α2 integrin also influenced the cellular localization of Cx43, promoting its presence in the plasma membrane. Activation of PTH1R by agonists such as parathyroid hormone (PTH) and parathyroid hormone-related protein (PTHrP) was also found to induce ERK 1/2 kinase phosphorylation, and these effects could be affected by Cx43 deficiency, but do not appear to be. mediated by the silencing of α2 integrin. Finally, it was observed that the presence of Cx43 and integrin α2 in osteocytes increases their adhesion capacity (Cx43+/+ SCR and RNAi α2 vs CX43-/- p < 0.001 and p = 0.0039) and that deficiency in Cx43 causes an increase in the mortality of these cells (Cx43-/- vs Cx43+/+ p = 0.0074).