Effects of epidermal growth factor on the [3H]-thymidine uptake in the SK-N-SH and SH-SY5Y human neuroblastoma cell lines Translated title: Efeitos do fator de crescimento epidérmico sobre a captação de [3H]-timidina nas linhas celulares de neuroblastoma humano SK-N-SH e SH-SY5Y

Abstract

The studies on the factors that regulate the biology of the neuroblastoma cell lines may offer important information on the development of tissues and organs that derive from the neural crest. In the present paper we study the action of epidermal growth factor (EGF) on two human neuroblastoma cell lines: SK-N-SH which is composed at least of two cellular phenotypes (neuroblastic and melanocytic/glial cells), and its pure neuroblastic subclone SH-SY5Y. The results show that EGF (10 ng/ml) significantly stimulates the incorporation of [3H]-thymidine in the SK-N-SH cells only in the presence of fetal bovine serum (FBS) (control = 58285 ± 9327 cpm; EGF =75523 ± 4457; p<0.05). Such effect is not observed in the presence of a chemical defined medium, that is, in the absence of FBS (control = 100997 ± 4375; EGF = 95268 ± 4683; NS). In the SH-SY5Y cells the EGF does not modify the incorporation of [3H]thymidine either in the presence of 10% of BFS (control = 113838 ± 6978; EGF = 119434 ± 9441; NS) or in its absence (control = 46197 ± 3335; EGF = 44472 ± 3493; NS). The results here reported suggest that: a) EGF may affect the proliferation of cells derived from a primary human neuroblastoma; b) this is evident by the EGF-induced increase of [3H]-thymidine incorporation in SK-N-SH cells; c) it is required the presence of other growth factors, present in the FBS, for the mitogenic action to be accomplished; d) since the pure neuroblastic SH-SY5Y cell line are refractory to the EGF, the effects observed in SK-N-SH cells probably occur on the melanocytic/glial cell subpopulation.

Translated abstract

Os estudos dos fatores que regulam a biologia das linhas celulares de neuroblastoma podem oferecer importantes informações sobre o desenvolvimento de tecidos e de órgãos que derivam da crista neural. No presente estudo analisamos a ação do fator de crescimento epidérmico (EGF) sobre duas linhas celulares de neuroblastoma humano: a linha SK-N-SH que é constituída de dois fenotipos celulares (neuroblástico e melanocítico/glial), e o seu subclone puro neuroblástico SH-SY5Y. Os resultados mostram que o EGF (10ng/ml) estimula significativamente a incorporação de [3H]-timidina na linha SK-N-SH somente na presença de 5% de soro fetal bovino (SFB) (controle = 58285 ± 9327 cpm; EGF = 75523 ± 4457; p<0,05). Tal efeito não é observado na presença de meio definido químico, isto é, na ausência de SFB (controle = 100997 ± 4375; EGF 95268 ± 4683; NS). Nas células SH-SY5Y o EGF não modificou a incorporação de [3H]-timidina nem na presença de 10% SFB (controle = 113838 ± 6978; EGF=119434 ± 9441; NS), nem na sua ausência (controle = 46197 ± 3335; EGF = 44472 ± 3493; NS). Os resultados aqui apresentados sugerem que: a) o EGF pode interferir na proliferação de células derivadas primariamente de um neuroblastoma humano; b) isso é evidente pelo aumento da incorporação de [3H] timidina pelas células SK-N-SH tratadas com EGF; c) é necessário a presença de outros fatores de crescimento, presentes no SFB, para que exerça esta ação mitógena; d) desde que a linha celular neuroblástica pura é refratária ao EGF, os efeitos descritos nas células SK-N-SH, provavelmente, ocorrem nas subpopulações de células melanocíticas/gliais.