Condiciones óptimas del análisis CASA-Mot del semen de verraco: efecto de la tasa de fotogramas para diferentes cámaras y campos de recuento espermático Translated title: Optimal conditions for CASA-Mot analysis of boar semen: Effect of frame rate for different chambers and sperm count fields

Abstract

RESUMEN El objetivo del estudio fue determinar el efecto de la tasa de fotogramas sobre diferentes profundidades de cámara de recuento espermático en semen de verraco y analizar la distribución de los espermatozoides en los campos longitudinales de la cámara de conteo. Se colectó una muestra de semen a 10 verracos Pietrain de 2-3 años. Se determinaron ocho parámetros de cinética espermática mediante el sistema CASA (Computer-assisted semen analysis)-Mot (ISAS®v1). Se utilizaron cámaras ISAS®D4C con profundidades de 10, 16 y 20 µm a una frecuencia de captura de imagen de 25, 40 y 60 fotogramas por segundo (fps). La profundidad de cámara afectó las variables de cinética espermática, obteniéndose valores más altos a 20 µm. La tasa de fotogramas (FR) presentó una relación positiva con los parámetros de cinética obteniéndose valores más altos a 60 fps, excepto para la amplitud del desplazamiento lateral de la cabeza (ALH) que presentó un comportamiento inverso. Según el análisis de regresión no lineal, la variable más sensible al cambio en FR fue la velocidad curvilínea (VCL), donde el mejor nivel fue dado con 80 fps. Se observó una disminución progresiva en los patrones cinemáticos conforme los espermatozoides avanzaban por los campos de las cámaras. Se concluye que el uso de diferentes cámaras de recuento y el incremento en el número total de fps genera cambios significativos en la estimación de parámetros de cinética espermática en el verraco.

Translated abstract

ABSTRAC The aim of the study was to determine the effect of the frame rate on different depths of the sperm counting chamber in boar semen and to analyse the distribution of sperm in the longitudinal fields of the counting chamber. A semen sample was collected from ten 2-3-year-old Pietrain boars. Eight sperm kinetic parameters were determined using the CASA (Computer-assisted semen analysis) - Mot (ISAS®v1) system. ISAS®D4C cameras with depths of 10, 16 and 20 µm were used at an image capture rate of 25, 40 and 60 frames per second (fps). Chamber depth affected the sperm kinetic variables, obtaining higher values at 20 µm. The frame rate (FR) presented a positive relationship with the kinetic parameters, obtaining higher values at 60 fps, except for the amplitude of the lateral displacement of the head (ALH), which presented opposite values. According to the nonlinear regression analysis, the most sensitive variable to the change in FR was the curvilinear velocity (VCL), where the best level was observed with 80 fps. A progressive decrease in kinematic patterns was provided as sperm advanced through the fields of the chambers. It is concluded that the use of different counting chambers and the increase in the total number of fps generates significant changes in the estimation of sperm kinetics parameters in the boar.