Proteinuria: lesión estructural renaly comparación de métodos Translated title: Proteinuria: renal structural injury and comparison of methods Translated title: Proteinúria: lesão estrutural renal e comparação de métodos

Abstract

La proteinuria (PT-ur) es un marcador de enfermedad renal, sin un método de referencia establecido. Mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) con tinción argéntica pueden identificarse de manera no-invasiva perfiles proteicos urinarios (PPU) de tipo glomerular (G), tubular (Tc: completos, Ti: incompletos) y mixtos (GTc, GTi) con fines diagnósticos/pronósticos y de evolución. El objetivo del estudio fue determinar la prevalencia (P) de los PPU para cada nivel de PT-ur obtenido con cuatro métodos diferentes, en pacientes con sospecha de lesión renal. Se procesaron 105 orinas de 24 h de recolección clasificadas mediante tira reactiva (TR) y 2 pacientes con proteinuria de Bence Jones (PBJ)>2 g/L. La cuantificación de PT-ur se realizó con ácido sulfosalicílico (SSA) y Bradford (CBB) "in-house"; cloruro de benzetonio (BZT-Roche) y rojo de pirogallol-molibdato (PRM-Wiener)-Hitachi 917. Se realizó uroproteinograma y SDS-PAGE. Los cuatro métodos presentaron correlación significativa (pla P del Ti fue del 33% y del 16% para GTi. En TR 1+/2+, el GTi de mediana selectividad presentó una P del 33%/30% y el GTc de 26%/57%, respectivamente, que se incrementó al 66% para TR 3+, con escasa-selectividad. Las PBJ presentaron valores estables mediante BZT, con diluciones manuales o realizadas por el equipo. La PT-ur mediante los métodos de cuantificación ensayados resultaron comparables y el BZT mostró PT-ur variables en presencia de PBJ dependiendo de la dilución empleada. En todos los niveles de PT-ur fue posible identificar la P de todas las lesiones estructurales con selectividades progresivamente comprometidas.

Translated abstract

Proteinuria (TP-ur) is associated with adverse outcomes. Analytical specificities as well as the calibration of the methods cause considerable variation of TP-ur. SDS-PAGE with silver staining is an excellent single-test for non-invasively diagnosing a complete (cT) or incompleted tubular (iT) and/or glomerular (G) protein profile (PP). In order to establish the prevalence (P) of structural lesions and to compare four TP-ur methods, one hundred and five 24 h urine collection, selected by dipstick urinalysis values (DUV), were analyzed. Coomassie Brilliant Blue G-250(CBB)/Sulphosalicylic Acid (SSA) (in-house manually developed methods) and benzethonium-chloride(BZT)/ pyrogallol red-molybdate(PRM) (Hitachi-917 analyzer) were employed. Two samples containing >2 g/L of Bence Jones protein (BJP) were assayed. SDS-PAGE and conventional zone electrophoresis (ZE), both stained with the silver stain procedure were developed. The data showed consistency in detecting a P of GiT (16%) and iT (33%) for negative DUV. 1+/2+ DUV presented a P of 33%, 30% for GiT with a partially conserved selectivity, and 26%, 57% of a GcT PP, respectively. In 3+ DUV a GcT PP was 66%, with non-selective profile. Statistically significant correlation coefficients (p2 g/L TP-ur must be performed by diluting the sample to get useful clinical information.

Translated abstract

A proteinúria (PT-ur) é um marcador de doença renal, sem um método de referência estabelecido. Através da eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) com tinção argêntea podem ser identificados de maneira não-invasiva perfis proteicos urinários (PPU) de tipo glomerular (G), tubular (Tc: completos, Ti: incompletos) e mistos (GTc, GTi) com fins diagnósticos/prognósticos e de evolução. O objetivo do estudo foi determinar a prevalência (P) dos PPU para cada nível de PT-ur obtido com quatro métodos diferentes, em pacientes com suspeita de lesão renal. Foram processadas 105 urinas de 24 h. de coleta classificadas mediante fita reagente (FR) e 2 pacientes com Proteinúria de Bence Jones (PBJ)>2 g/L. A quantificação de PT-ur foi realizada com ácido sulfossalicílico (SSA) e Bradford (CBB) "in-house"; cloreto de benzetônio (BZT-Roche) e vermelho de pirogalol-molibdato (PRM-Wiener)-Hitachi917. Realizou-se uroproteinograma e SDS-PAGE. Os quatro métodos apresentaram correlação significativa (p< 0,05) para PT-ur e uma comparação estatisticamente não-significativa de médias em todos os níveis de TR. Para TR negativa (PT-ur em faixa normal), a P do Ti foi de 33% e de 16% para GTi. Em TR 1+/2+, o GTi de média seletividade apresentou uma P de 33%/30% e o GTc de 26%/57%, respectivamente, que aumentou para 66% para TR 3+, com escassa-seletividade. As PBJ apresentaram valores estáveis mediante BZT, com diluições manuais ou realizadas pela equipe. A PT-ur mediante os métodos de quantificação ensaiados resultaram comparáveis e o BZT mostrou PT-ur variáveis em presença de PBJ dependendo da diluição utilizada. Em todos os níveis de PT-ur foi possível identificar a P de todas as lesões estruturais com seletividades progressivamente comprometidas.