Resistencia a aminoglucósidos por los genes aph(3')-VIa y aac(3')-II en Acinetobacter baumannii aislados en Montería, Colombia Translated title: Aminoglycoside resistance by aph(3’)-VIa and aac(3´)-II genes in Acinetobacter baumannii isolated in Montería, Colombia

Abstract

Objetivo: Investigar la resistencia a aminoglucósidos en cepas de A. baumannii por expresión de genes aph(3')-VIa y aac(3')-H, de una clínica privada en Montería. Materiales y Métodos: Entre agosto de 2005 y febrero de 2007 se recolectaron 17 aislamientos de A. baumannii resistentes a aminoglucosidos de una clínica privada de tercer nivel de Montería. Se determinó la susceptibilidad antimicrobiana mediante la concentración mínima inhibitoria. Se amplificaron y secuenciaron los genes aph(3')-VIa/ aph(3')-Ia, aac(3)-l, aac(3)-ll y aac(6)-la. El análisis de las secuencias se realizó con la base de datos GenBank y el motor de búsqueda BLASTX. El ADN de todos los aislamientos fue preparado en bloques de agarosa y digerido con Apal. Resultados: Dieciséis de 17 aislamientos (94,1%) resistentes a amikacina fueron positivos para el gen aph(3')-VIa y todos los aislamientos fueron positivos para aac(3')-II, ningún aislamiento resulto positivo para los genes aac(3')-l, aph(3')-la y aac(6')-l. La PFGE mostró 8 pulsotipos con dos clones en 11 aislamientos, distribuidos en 7 aislamientos pulsotipo l y 4 aislamientos pulsotipo ll. Los otros seis pulsotipos comprendieron aislamientos no relacionados. Conclusión: La resistencia a los aminoglucósidos en A. baumannii esta codificada principalmente por el gen aph(3')-VIa y el gen aac(3')-II. El análisis epidemiológico molecular demostró que la resistencia a amikacina se debe a la diseminación del gen aph(3')-VIa en aislamientos de A. baumannii que en muchos casos como el de este estudio causa brotes

Translated abstract

Objetive: lnvestigate aminoglucoside-resistant A. baumannii strain by expressing aph(3')-Vla y aac(3')-llgenes, in a clinicfrom Monteria. Materials and Methods: Between august 2005 andfebruary 2007 were collected 17 iso-lates of A. baumannii resistant to aminoglycosides at a private clinic providing tertiary care in Monteria. Antimicrobial susceptibility was determined by minimum inhibitory concentration. Were amplified and sequenced the genes aph(3')-VIa, aph(3')-Ia, aac(3)-I, aac(3)-ll y aac(6)-la. The sequence analysis was performed with the GenBank database and BLASTX search engine. DNA of all isolates were prepared in agarose blocks and digested with the restriction enzyme Apal. Results: Sixteen of 17 isolates (94,1%) resistant to amikacin were positive for the gene aph(3')-VIa and all isolates were positive for aac(3')-II, no isolates were positive for the gene aac(3')-I, aph (3')-Ia and aac(6')-I. The PFGE pulsotypes showed 8 with two clones in 11 isolates, distributed in 7 isolates pulsotypes and 4 isolates pulsotypes ll. The other six pulsotypes included isolates unrelated. Conclusion: resistance to aminoglycosides in A. baumannii is primarily coded by the gene aph(3')-VIa gene and the aac(3')-II. Molecular epidemiological analysis showed that resis-tance to amikacin is due to the large spread of the gene aph(3')-VIa in A. baumannii isolates that in many cases as in this study cause outbreaks.