Produção de soros policlonais com alta afinidade contra o biotipo 'C' e o biotipo 'S' de Crinipellis perniciosa Translated title: Production of high affinity polyclonal sera against Crinipellis perniciosa biotypes 'C' and 'S'

Abstract

A obtenção de soros policlonais contra fitopatógenos tem por finalidade a elaboração de imunoensaios que permitam identificar e caracterizar os mesmos com rapidez e a custos baixos. Soros policlonais foram produzidos contra extratos das hifas de isolados de Crinipellis perniciosa, agente causal da vassoura-de-bruxa, coletados de cacaueiro (Theobroma cacao) nos estados do Pará e Bahia para identificação e caracterização de isolados de diversas regiões e hospedeiros. O soro denominado de 1 foi produzido a partir do isolado ESJOH-1 (originário do Pará), e o soro 2 foi produzido com o isolado CP-85 (originário da Bahia). Não houve reação cruzada dos soros contra extratos protéicos das espécies Alternaria solani, Marasmius sp., Oudemansiella canarii e Verticillium fungicola. Os soros apresentaram reação cruzada de alta afinidade com extratos de Moniliophthora roreri e de baixa a média afinidade com Marasmius cladophyllus. A caracterização dos isolados foi feita com amostras do biotipo-C coletados no Amazonas, Bahia, Mato Grosso, Rondônia e Pará. As reações sorológicas dos dois soros não permitiram diferenciar os isolados do Pará e da Bahia, contra os quais foram produzidos, e também não reagiram diferencialmente com isolados de outros estados. O reconhecimento dos antígenos entre os soros foi variável, pois o soro 1 e soro 2 apresentaram reação sorológica diferenciada para alguns isolados. Os soros produzidos apresentaram alta afinidade contra isolados dos biotipos-C e S, independente de sua origem geográfica, podendo ser usados para identificação.

Translated abstract

The production of polyclonal sera against plant pathogens allows the development of immunoassays to quickly identify and characterize the pathogens at low cost. Polyclonal sera were produced against Crinipellis perniciosa, the causal agent of witches' broom disease of cacao (Theobromae cacao) using hyphae extracts from isolates collected in Pará and Bahia states, to identify and distinguish isolates from various regions and hosts. Serum 1 was produced from isolate ESJOH-1 (collected in Pará) and serum 2, from isolate CP-85 (from Bahia). There was no cross reaction between the two sera with mycelia extracts from Alternaria solani, Marasmius sp., Oudemansiella canarii and Verticillium fungicola. The sera presented high affinity cross reaction with Moniliophthora roreri and medium- to low cross-reaction against Marasmius cladophyllus. The sera were evaluated against isolates from biotype-C, collected in the states of Amazonas, Bahia, Mato Grosso, Rondônia and Pará. The serological reaction of both sera did not allow to distinguish the isolates' site of origin (Pará and Bahia), nor did they differentiate isolates of biotype C. The antigen binding sites were different for serum 1 and 2, because both exhibited different response to the same strains. However, these differences in affinity did not allow for differentiating the origin of collection, host or biotype, but allowed for the identification of C. perniciosa belonging to biotypes C and S.