Legionelose associada a pneumopatias em São Paulo: estudo da comprovação etiológica por isolamento e sorologia Translated title: Legionellosis associated to pneumopaties in São Paulo: etiological confirmation by means of isolations and sorology

Abstract

A presença de Legionella sp como patógeno atuante em nosso país não fora bem documentada, embora a literatura refira a importância deste agente em grande número de países. O presente trabalho teve como objetivo a detecção do microrganismo ou evidenciar sua resposta imunológica em pacientes portadores de pneumopatias infecciosas na cidade de São Paulo. Para tanto foi introduzida metodologia laboratorial específica para o cultivo e identificação do agente e aplicada reação sorológica para verificação de níveis de anticorpos correspondentes. Foram estudados pacientes de 2 centros universitários em São Paulo, correspondentes a 100 do Hospital Universitário U.S.P. com pneumopatias infecciosas em geral e 100 do Hospital das Clínicas F.M.U.S.P. com pneumopatias infecciosas previamente selecionados para afastar outras etíologias bacterianas e dentre estes 30 pertencentes a Unidade de Transplante Renal. O material biológico destinado ao cultivo de Legionella sp foi constituído por: escarro, secreção traqueal, líquido pleural, lavado brônquico ou biópsia de tecido pulmonar. As tentativas de isolamento do agente foram realizadas em meio de BCYE com e sem antibióticos, a identificação das colônias, foram realizadas através de provas de crescimento em placas de BCYE sem cisteína, provas bioquímicas, imunofluorescência direta e soroaglutinação em lâmina. A pesquisa do agente em material biológico foi realizado pelo método de imunofluorescência direta. A pesquisa de anticorpos específicos para Legionella pneumophila sorogrupo 1 foi efetuada pela reação de imunofluorescência indireta. Procedeu-se ainda a estudo sorológico) nos comunicantes de pacientes com legionelose para evidenciar possível transmissão do agente. Em 2 casos obteve-se isolamento em cultura e em 4 casos, somente reação de imunofluorescência direta positiva para L. pneumophila sorogrupo 1, à partir do material biológico, representando um total de 6% entre pacientes da comunidade e hospitalares, comprovando desta forma a existência do agente entre nós. A reação sorológica de imunofluorescência indireta permitiu estabelecer infecção atual ou pregressa por Legionella pneumophila sorogrupo 1, em 16 dos 100 pacientes estudados no Hospital das Clínicas e em apenas 1 dos 100 pertencentes ao Hospital Universitário. Pacientes considerados como grupo de risco do Hospital das Clínicas correspondentes a transplantados renais mostraram evidências sorológicas de legionelose atual ou pregressa em 10 dos 30 estudados, isto é 33%, ficando com 8,5% para pacientes da comunidade, 6 dos 70 estudados, sendo 3 destes debilitados por doença sistêmica severa (4,28%). Nos profissionais de saúde comunicantes dos pacientes com legionelose internados no Hospital das Clínicas, apenas 1 em 28 revelou sorologia compatível com infecção pregressa, confirmando dados da literatura de não ser usual a transmissão de pessoa a pessoa

Translated abstract

The role of Legionella sp as an important pathogen, although reported in many countries, had not been well documented in Brazil. The main objetive of the present study is to detect this organism or it's immunological response in patients with pulmonary infections in the city of São Paulo. For this purpose, specific laboratory methodology was introduced to cultivate the agent and demonstrate specific antibodies by serology. Patients from two University centers in São Paulo were studied: 100 from the Hospital Universitario, University of São Paulo with general pulmonary infections and 100 from Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina, University of São Paulo. The latter woe selected to exclude pulmonary infections of other bacterial aetiology, and 30 of these were selected from the Renal Transplant Unit. Clinical specimens for cultures included sputum tracheal secretion, pleural, fluid, bronchial washing or lung tissue biopsy. Isolation of Legionella sp was attempted in BCYE medium with and without antibiotics, presumptive diagnosis by biochemical methods and identification through direct immunofluorescence staining and slide agglutination test. Direct evidence of the organism in tissue was attempted by direct immunofluorescence staining. Specific antibodies for Legionella pneumophila serogroup 1 were tested by the indirect immunofluorescence assay. Serology was also carried out in specimens from human contacts with Legionnaires' Disease. Legionella pneumophila serogroup 1 was isolated from two patients, demonstrating the presence of the pathogen in this country. Serology was able to estabilish present or past infection with the agent in 16 of the 100 patients from Hospital das Clinicas and in only one from Hospital Universitário. In patients considered as high risk groups from Hospital das Clínicas with renal transplantation, serology for present or past Legionellosis was positive in 33% and in 8.5% for community acquired infections. Serology in specimens from Medical personnel in contact with patients of Legionnaires' disease was positive for past infection in one single subject, confirming information already published that direct transmission from person to person is unusual. The introduction of specific methods for laboratorial evidence of Legionella sp infections at the Hospital das Clínicas - Faculdade de Medicina USP community has permited diagnosis in able time to allow use of specific anti-microbial therapy, with good results